analiza żelow metoda DIGE

BLAGAM O POMOC, NA CZYM POLEGA METODA DIGE, PROSTO I PO POLSKU PROSZE O WYJASNIENIE..WSZYSTKO PO ANGIELSKU PISZE

a coz to za problem ze po angielsku. angielski jest w life sciences absolutnie niezbedny.
dige to dwuwmiarowa metoda elektroforetyczna pozwalajaca na porownanie skladu bialkowego dwoch (a mozliwe ze i wiekszej ilosci) probek. jest to modyfikacja normalnej elektorforezy 2d (pierwszy wymiar to ogniskowanie izoelektryczne, drugi wymiar - rozdzial w warunkach denaturujacych).
z uwagi na niska powtarzalnosc (spowodowana przede wszystkim przez slaba powtarzalnosc izoogniskowania) oraz trudnosci w analizie obrazu skladajacego sie z tysiecy spotow, tradycyjne podejscie do analizy proteomu oparte na elektroforezie 2d i barwieniu srebrem jest malo skuteczne. obecnie te klasyczne metody sa wypierane m. in. przez technike dige.
jej zasada jest nastepujaca: 2 probki znakuje sie roznymi barwnikami fluorescencyjnymi, miesza ze soba i wykonuje izoogniskowanie a nastepnie rozdzial w drugim wymiarze. dzieki temu ze caly rozdzial przebiega w tych samych warunkach, odpowiadajace sobie spoty z obu probek dokladnie nakladaja sie na siebie (co np. przy fluoroforach zoltych i niebieskich daje pomaranczowa fluorescencje). w ten sposob mozna bardzo latwo i z duzym przedopodobienswem zidentyfikowac roznice w profilach ekspresji. dodatkowo, dzieki zastosowaniu barwienia fluorescencyjnego czulosc takiej metody jest bardzo wysoka.