problem z testem inhibicji fosfatazy (PP1 lub PP2A)

Wysłany: 31.01.2007, 13:02:38

Kłaniam sie uprzejmie.
Jestem pracownikiem Wydziału Biotechnologii UJ.
Prowadzę badania nad toksynami sincowymi, mam problem z
kolorymetrycznym testem inhibicji PP2A. Wcześniej używałem
produktu firmy Sigma oznaczonego nr P 9989 i wszystko było w
porządku, ale obecnie w Sigmie wycofano go z produkcji, a inna
fosfataza, którą zamówiłem (nr P1618) nie działa zarówno w
teście kolorymetrycznym (substrat pNPP) jak i fluorymetrycznym
(substrat MUF). Próbowałem już różnych modyfikacji (zmiana pH,
różne stężenia reagentow) ale nic to nie dało. Czy ktoś z użytkowników
forum ma wiedzę na temat metodyki tego testu i byłby w stanie pomóc?
Byłbym bardzo wdzięczny

Dariusz Dziga