Elektroforeza SDS PAGE Western blot !!!!!!!!!!!!!!!

Oznaczam multimery adiponektyny w surowicy krwi.
Mam problem z elektroforezą SDS PAGE. Przy stężeniu białka całkowitego w surowicy krwi u pacjenta np. 4, 64 g/dl , a adiponektyny w surowicy krwi 0,5 mikrog/ml, to powinnam brać pod uwage stężenia białka całkowitego czy adiponektyny w surowicy krwi gdy przeliczam ilość mikrogramów białka na studzienkę.
Mam równiez problem z przeliczaniem stezenia białka a ilościa mikrogramów na studzienkę (czy 5, 10, 20 ,30 , 50 mikrogramów na studzienkę). Ile nakładać na żel o grubości 1 mm surowicy ( w czym mam ją rozcieńczac), sample buffer ( ile steżony powinien być) , czy tez wodę. Objętość końcowej próbki przy żelu 1 mm powinna być 25 mikrol. Jak to wszystko przeliczyć aby uzyskać końcową objętość próbki 25 mikrol. Jaka proporcja powinna być surowicy i sample buffer (ile steżony).

Proszę o odpowiedz.
Pozdrawiam[/b]