Artykuły • GMO • Słownik • Praca • Studia • Forum
Aktualności: • Organizmy transgeniczne, GMO • Klonowanie • Komórki macierzyste • Nowotwory, rak • Wirusologia, HIV, AIDS • Genetyka • Medycyna i fizjologia • Aktualności biotechnologiczne • Biobiznes

Hybrydyzacja kwasów nukleinowych

Kasia |

Metoda badania kwasów nukleinowych oparta na zdolności do tworzenia kompleksu dwuniciowego przez jednoniciowe, komplementarne fragmenty kwasów nukleinowych.

Hybrydyzacja polega na wzajemnym oddziaływaniu pomiędzy badanym fragmentem kwasu nukleinowego a sonda molekularną, które prowadzi do wytworzenia hybrydu (dupleksu) o dwuniciowej strukturze. W przypadku dwuniciowego fragmentu kwasu nukleinowego tworzenie hybrydu poprzedzone jest denaturacją pod wpływem działania zasad lub wysokich temperatur. Proces łączenia sondy molekularnej z fragmentem docelowym kwasu nukleinowego jest wysoce specyficzny w odpowiednich warunkach i zachodzi zgodnie z zasadą komplementarności. Odpowiednio przygotowana sonda molekularna, w optymalnych warunkach rozpoznaje sekwencje różniące się zaledwie kilkoma nukleotydami i tworzy trwałe wiązania tylko z komplementarnym fragmentem kwasu nukleinowego. Badany DNA lub RNA może być denaturowany i unieruchamiany na filtrach, a następnie poddawany procesowi identyfikacji za pomocą znakowanej radioaktywnie lub nieradioaktywnie sondy molekularnej.